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UV1800PC紫外可見分光光度計法檢測亞硝酸鹽

萘乙二胺分光光度法 

分光光度計簡介

紫外分光光度法其比較重要的用途是用于有機化合物的定性和定量分析方面。因為很多有機化合物及其衍生物在紫外波段有強的吸收光譜，可以把未知試樣的紫外吸收光譜圖和標準試樣(或與標準準圖譜)比較，當濃度和溶劑相同時，若兩者的譜圖相同（峰、極小值和拐點的λ相同），而且未知樣品大體已知時，可以說明它們是同一個化合物。但是在紫外和可見光區域，這些特征的峰、極小值和拐點的數目往往是有限的，且紫外吸收光譜的吸收峰還較寬，兩種不同的化合物可能有相同的紫外吸收光譜，對于*未知的有機化合物，有時可以通過改換溶劑和適當的化學處理之后所得的未知標準光譜對照，不僅比較λ，還要比較它們的λmax和A，來進一步確證，甚至還要進一步借助紅外、核磁和質譜等手段才能zui后得出結論。    紫外分光光度法進行定量分析是有快速，靈敏度高及分析混合物中各組份有時不需要事前分離，不需要顯色劑，因而不受顯色劑溫度及顯色時間等因素的影響，操作簡便等優點。目前廣泛用于微量或痕量分析中。但有一個局限性，就是待測試樣必須在紫外區有吸收并且在測試濃度范圍服從比耳定律才行。    利用紫外光度法測定試樣中單組份含量時，通常先測定物質的吸收光譜，然后選擇zui大吸收峰的波長進行測定。其原理與一般比色分析相同。可用標準工作曲線法。如果通過實驗證明，在測定條件下符合比耳定律，也可以不用標準曲線而與標準品的已知濃度溶液比較求出未知樣品濃度。

紫外可見分光光度計檢測亞硝酸鹽的原理

紫外分光光度計法的使用基于朗伯-比耳定律。朗伯-比耳定律(Lambert－Beer)是光吸收的基本定律，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據和基礎。當入射光波長一定時，溶液的吸光度A是吸光物質的濃度C及吸收介質厚度l(吸收光程)的函數。

物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同。因此，每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。又因為許多物質在紫外-可見光區有特征吸收峰，所以可用紫外分光光度法對這些物質分別進行測定（定量分析和定性分析）。    

 在酸性介質中亞硝酸鹽與磺胺進行重氮化反應，其產物再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色偶氮染料，于543 nm波長測定吸光值。 

 注意事項：大量的硫化氫干擾測定，可在加入磺胺后用氮氣驅除硫化氫。

試劑： 除非另作說明，所用試劑均為分析純，水為無亞硝酸鹽的二次蒸餾水或等效純水。 磺胺溶液：10 g/L  稱取5 g碘胺(NH2SO2C6H4NH2)，溶于350 mL鹽酸溶液(1+6)，用水稀釋至500 mL，盛于棕色試劑瓶中，有效期為2個月。 38.1.3.2  鹽酸萘乙二胺溶液：1 g/L 稱取0.5 g鹽酸萘乙二胺(C10H7NHCH2CH2NH2·2HCl)，溶于500 mL水中，盛于棕色試劑瓶中于冰箱內保存，有效期為1個月。

 亞硝酸鹽氮標準溶液： 

 亞硝酸鹽氮標準貯備溶液：100 μg/mL-N 

    稱取0.492 6 g亞硝酸鈉(NaNO2)經110℃下烘干，溶于少量水中后全量轉移入1 000 mL量瓶中，加水至標線，混勻。加1 mL三氯甲wan(CHCl3)，混勻。貯于棕色試劑瓶中于冰箱內保存，有效期為兩個月。 

亞硝酸鹽氮標準使用溶液：5.0 μg/mL-N 移取5.00 mL亞硝酸鹽氮標準貯備溶液(38.1.3.3.1)于100 mL量瓶中，加水至標線，混勻。臨用前配制。

  儀器及設備 

    ——分光光度計(723nPC/723SPC/UV1700PC/uv1800pc)；     

——量瓶：100，1 000 mL各1個；     

——量筒：50，500 mL各1個； 

    ——具塞比色管：50 mL(帶刻度)，30個；  

   ——燒杯：100，500 mL，各1個； 

    ——試劑瓶：棕色500 mL，2個，1 000 mL，1個； 

    ——聚乙烯洗瓶：500 mL，1個；  

   ——自動移液管：1 mL，2支；    

 ——刻度吸管：1，5 mL，各1支； 

    ——吸氣球：1只； 

    ——玻璃棒：直徑5 mm，長15 cm，2支；    

 ——一般實驗室常備儀器和設備。 38.1.5  分析步驟 

繪制標準曲線 

 取6個50 mL具塞比色管，分別加入0，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50 mL亞硝酸鹽標準使用溶液(38.1.3.3.2)加水至標線，混勻。標準系列各點的濃度分別為0，0.010，

 0.020，0.030，0.040，0.050 mg/L。 

  各加入1.0 mL磺胺溶液(38.1.3.1)，混勻。放置5 min。 

 各加入1.0 mL鹽酸萘乙二胺溶液(38.1.3.2)混勻。放置15 min。 

  選543 nm波長，5 cm測定池，以水作參比，測其吸光值Ai。其中零濃度為標準空白吸光值A0。 

 以吸光值(Ai-A0)為縱坐標，濃度(mg/L)為橫坐標繪制標準曲線。 38.1.5.2  水樣的測定 

  移取50.0 mL已過濾的水樣于具塞比色管中。 

 參照(38.1.5.1.2～38.1.5.1.4)步驟測量水樣的吸光值Aw。 38.1.5.2.3  量取50.0 mL二次去離子水，于具塞比色管中，參照上述38.1.5.1.2～38.1.5.1.4步驟測量分析空白吸光值 記錄與計算 

    將測得數據記錄于分析記錄附錄表A2及表A1中，按式(68)計算An。 

An=Aw—Ab    ……………………… (68) 

    由An值查工作曲線或按式(69)計算水樣中亞硝酸鹽氮的濃度。 

ρNO2—N=baAn  ……………………… (69) 式中：ρNO2—N——水樣中亞硝酸鹽氮的濃度，mg/L；              An——水樣中亞硝酸鹽氮的吸光值；               a——標準曲線中的截距；           b——標準曲線中的斜率。 38.1.7  精密度和準確度 38.1.8  注意事項 

 水樣加鹽酸萘乙二胺溶液后，須在2 h內測量完畢，并避免陽光照射。 38.1.8.2  溫度對測定的影響不顯著，但以10～25 ℃內測定為宜。 38.1.8.3  標準曲線每隔一周須重制一次，當測定樣品的實驗條件與制定工作曲線的條件相差較大時，如更換光源或光電管、溫度變化較大時，須及時重制標準曲線。